對羥基苯甲酸酯類作為食品防腐劑被廣泛應(yīng)用在各類食品中，是國際上公認(rèn)的安全、高效、廣譜防腐劑，對霉菌、酵母、細(xì)菌有抗菌作用，因此被廣泛應(yīng)用于食品的防腐。但大量攝入對羥基苯甲酸酯類會危害人體健康，因此其一直是guo家食品安全檢測抽查的重點(diǎn)項目。

根據(jù)《食品安全guo家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》 （GB 2760-2014），允許添加對羥基苯甲酸酯類防腐劑的食品種類有經(jīng)表面處理的鮮水果和鮮蔬菜、果醬、醋、醬油、醬及醬制品、蠔油、果蔬汁類飲料、碳酸飲料等。其中，近幾年的guo家食品安全監(jiān)督抽檢，醬油和醋中對羥基苯甲酸酯防腐劑幾乎是必檢項目。

釀造醬油的樣品預(yù)處理

醬油的釀造，經(jīng)歷蛋白質(zhì)的水解、淀粉的水解、有機(jī)酸生成和酒精發(fā)酵多個階段，使醬油呈味、呈色、增香。醬油的顏色及味道一部分來源于醬油本身發(fā)酵過程，另一部分來源于醬油配兌過程中添加的多種添加劑，如增鮮劑、色素和甜味劑等。因此，釀造醬油是一種復(fù)雜基質(zhì)的加工食品，樣品預(yù)處理的效果對其檢測成功至關(guān)重要。對于分析化學(xué)來說，在復(fù)雜基質(zhì)中分離目標(biāo)物和非目標(biāo)物往往難度很大，其樣品前處理傳統(tǒng)手段含有多項冗長的操作步驟，效率低下，并且往往還無法達(dá)到理想的凈化效果。

現(xiàn)行的《食品安全guo家標(biāo)準(zhǔn) 食品中對羥基苯甲酸酯類的測定》（GB 5009.31-2016）中，針對氣相色譜法檢測的樣品預(yù)處理技術(shù)主要采用多次液液萃取+液液洗滌的技術(shù)，該方法操作繁瑣、檢測耗時長、有機(jī)溶劑消耗量大（其中包括消耗大量的易制毒化學(xué)試劑），且回收率較低、穩(wěn)定性差，另外凈化效果也不佳，往往存在著干擾檢測的雜質(zhì)成分。而本公司針對釀造醬油這種復(fù)雜食品基質(zhì)，開發(fā)出了釀造醬油中對羥基苯甲酸酯類色譜檢測預(yù)處理專用方法包，這個方法包所采用的雙柱SPE法可實現(xiàn)高效、穩(wěn)定可靠地從各種復(fù)雜基質(zhì)的釀造醬油中提取、分離和凈化4種對羥基苯甲酸酯類（對羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯和丁酯），消耗的有機(jī)溶劑僅為guo家標(biāo)準(zhǔn)的30%不到，不使用任何易制毒化學(xué)試劑，且在保證4種對羥基苯甲酸酯類同時80%以上回收率及小于5%重復(fù)性RSD的前提下，實現(xiàn)良好的凈化效果，大幅度減少對色譜柱及色譜管路污染、甚至堵塞情況，可以很好地保護(hù)色譜系統(tǒng)。接下來主要介紹一下本專用方法包。

產(chǎn)品組成

提取液：從醬油樣品中提取對羥基苯甲酸酯類；

萃取液：使對羥基苯甲酸酯類提取液中的雜質(zhì)沉淀分離；

萃取管：管中的吸附劑可吸附萃取時沉淀的雜質(zhì)；

凈化專用SPE柱（雙柱）：吸附醬油中不同種類的色素；

SPE淋洗液：將被SPE柱吸附的雜質(zhì)淋洗出來；

SPE洗脫液：將被SPE柱吸附的目標(biāo)物洗脫下來。

主要操作流程

1. 醬油樣品稱量：jing確稱取5g醬油樣品；

2. 分離提?。菏褂谩疤崛∫骸?，振蕩分離提??；

3. 萃取：取試樣提取上清液進(jìn)行萃取，使用“萃取管”和“萃取液”，類似于QuEChERS的操作；

4. 凈化：使用雙柱串聯(lián)的“凈化專用SPE柱”，上樣，用“SPE淋洗液”和“SPE洗脫液”進(jìn)行SPE操作，洗脫液收集后旋蒸蒸干；

5. 殘留樣品用溶劑復(fù)溶，過濾后上氣相色譜檢測。

方法包與國標(biāo)預(yù)處理技術(shù)對比

回收率高，穩(wěn)定性好

用本方法包對加標(biāo)的釀造醬油進(jìn)行預(yù)處理后，色譜法測得的對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯的回收率一般在80%~105%之間，四種對羥基苯甲酸酯類各自氣相色譜檢測結(jié)果的重復(fù)性（RSD）<5%。

凈化效果好

1）方法包和國標(biāo)方法預(yù)處理后的未加標(biāo)醬油樣品色譜圖對比

2）經(jīng)方法包預(yù)處理的加標(biāo)醬油樣品色譜圖

3）4種對羥基苯甲酸酯類標(biāo)準(zhǔn)色譜圖