
2022-08-23
俗話說的好:“磨刀不誤砍柴工,工欲善其事,必先利其器”??梢哉f,色譜柱是色譜分析過程中更重要的部分,相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數(shù)將會(huì)造成什么影響。比如色譜柱尺寸:柱長、內(nèi)徑;色譜柱填料:粒徑、孔徑、比表面積、基質(zhì)及其表面特征、載碳量鍵合相類型。
在日常液相分析中,正確選擇適合自己實(shí)驗(yàn)的色譜柱,將會(huì)使得你的實(shí)驗(yàn)事半功倍!今天小編就在這里淺談液相分析中如何選擇液相色譜柱。
色譜柱參數(shù)--- 柱長 兩支同填料的色譜柱,柱長越長,分離時(shí)間越長,但柱越長分離度將會(huì)更好,同時(shí)柱壓也將更大,可結(jié)合樣品的復(fù)雜性和希望的分離時(shí)間來選擇合適的柱長,一般為2.0~250mm。 色譜柱參數(shù)--- 內(nèi)徑 窄徑柱可提高柱的靈敏度,并可明顯降低溶劑的使用量; 寬徑柱可以將系統(tǒng)死體積的影響降到更低,載樣量高,抗污染。 色譜柱參數(shù)--- 粒徑 例如:1.8μm、3μm、5μm、10μm等,粒徑越小,分離越快,柱效越高。但柱壓力越高,柱容易被污染,壽命低。 色譜柱參數(shù)--- 孔徑 孔徑小,含孔率高,則比表面積大,載碳量高。 色譜柱參數(shù)--- 比表面積 例如:180㎡/g、320㎡/g等(Ultimate系列為320㎡/g),選擇適合目標(biāo)物的比表面積,每克填料的表面積(與粒度、含孔率有關(guān)),比表面積大,會(huì)增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng),增加保留、載樣量增加,比表面積小可以縮短分析時(shí)間和梯度時(shí)的平衡時(shí)間。 色譜柱參數(shù)--- 載碳量 例如:10%、14%、17%、23%等,載碳量通常影響選擇性。硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積,鍵合覆蓋度等有關(guān)。載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。制備色譜的上樣量也可以增加。 色譜柱參數(shù)--- 硅膠基質(zhì) 1. 硅膠基質(zhì)色譜柱較其他材料制成的柱子有更高的柱效; 2. 硅膠機(jī)械強(qiáng)度好; 3. 硅膠表面可化學(xué)修飾制成具有各種官能團(tuán)的鍵合相; 4. 硅膠填料不會(huì)發(fā)生體積的變化; 5. 硅膠在高pH值下會(huì)溶解; 6. 硅膠表面酸性,在分離堿性化合物時(shí)容易產(chǎn)生拖尾。 色譜柱參數(shù)--- 聚合物基質(zhì)填料 1. 交聯(lián)苯乙烯/二乙烯基苯、甲基苯烯酸酯等; 2. pH穩(wěn)定性好:pH1-14; 3. 可以在很寬的范圍內(nèi)進(jìn)行表面化學(xué)處理以滿足反相色譜、離子交換色譜、疏水作用色譜和體積排阻色譜的需求; 4. 在中等pH條件下對(duì)強(qiáng)堿性物質(zhì)具有更好的峰形; 5. 填料的體積隨著流動(dòng)相的不同而改變,如膨脹或收縮; 6. 分離效率相對(duì)硅膠而言比較低; 7. 重現(xiàn)性不好; 8. 機(jī)械強(qiáng)度差。 色譜柱參數(shù) --- 硅醇基 硅醇基的酸性較大,可與堿性化合物由于靜電作用力而牢固的結(jié)合,因此含有較多殘留硅醇基的填料在分離堿性化合物時(shí)容易產(chǎn)生拖尾、變寬、保留延長等現(xiàn)象。 如何屏蔽剩余硅羥基的影響:加入適當(dāng)?shù)膾呶矂┤缛野房梢匝诒螝埩舻墓枇u基,使堿性化合物峰形變好;降低流動(dòng)相pH值小于3,可以減小硅醇基的反應(yīng),從而減小拖尾現(xiàn)象。或者選擇優(yōu)先使用雙封尾的色譜柱。 色譜柱參數(shù) --- 封尾 為了降低硅醇基的影響,需要對(duì)色譜柱進(jìn)行封尾,通常為鍵合填料與小硅烷(如:三甲基硅烷)進(jìn)行后續(xù)反應(yīng),屏蔽掉部分殘留硅醇基。 封尾的目的:1.屏蔽殘留的硅醇基;2.改善選擇性。 色譜柱參數(shù) --- 鍵合相的分類 鍵合相:反相(70%);C18(65%);C8(15%);Cyano(5%);苯基柱(<5%);正相(20%;硅膠、-NH2、-CN);其它(10% ;手性柱、離子交換柱)。 同一廠家相同硅膠基質(zhì)的反相柱:保留值隨著碳載量的增加而增加;鍵合碳鏈越長,保留越大,C18≈C8>C4>C1,長鏈之間差異不大,根據(jù)待分析物質(zhì)的性質(zhì),選擇合適的鍵合相和分離模式。
| 日本无码一区二区精品影片潘金莲 | 欧韩午夜色情A片影院 | 免费婬乱AAA大片女人添比 | 日本久久久久久xx免费观看 | 国产特黄无码A片免费看 | 欧美日韩高清在线观看 | 日本五十路熟妇视频 | 成人免费看A片WWW | 巜按摩人妻波多吉野中文字幕 | 91人妻无码精品一区区毛片 | 天天看天人人人人人人 | 亚洲无码av一区二区三区 | 无码免费一区二区三区电影 | 果冻传媒之漂亮人妻煮饭 | 无码人妻精品一区二区蜜桃在 | 午夜拍拍拍拍拍拍拍拍拍拍拍 | 成人国产精品秘 在线鲁大男同 | 免费的黄色视频网站下载在线 | 精品国产69久久久久久黄无码臀 | 台湾三级午夜理伦三级 | 97久久精品人人澡人人爽 | 老师搡BBBB搡BBB搡爱恋 | 91中文人妻熟女乱又乱精品 | 影音先锋无码av在线 | 成熟少妇婬水A片好爽免费观 | 四川农村少妇A片免费看 | 特黄a又粗又大又黄又爽A片麻豆 | 99久久婷婷国产综合精品电影 | 一级黄色免费在线观看 | 国产一级a毛一级a毛观看视频网站 | 国产精品久久久久久久久久久久久久软件 | 免费一级婬片A片高潮喷水 影音先锋AV无码男人专区 | 国产欧美大屁股喷水无码视频 | 欧美91精品国产玩人妻 | 污污污视频在线观看一区二区三区 | 老色鬼久久AV综合亚洲健身 | 91麻豆精品91久久久久同性 | 欧美一级婬片A片免费软件 国产成人+ 8x8+高潮 | 51无码人妻熟妇五十路 | 久久成年人视频免费 |