
2022-09-29
極性較大的化合物在分析測試過程中,通常在常規(guī)非極性柱上保留很弱,即便有機(jī)相比例降到很低,也很難實(shí)現(xiàn)保留增強(qiáng),易受空白溶劑或空白輔料的干擾,于是排除干擾就成了方法設(shè)定中很重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。
應(yīng)用實(shí)例 氨基丁酰胺的極性大,紫外吸收弱,在常規(guī)C18柱上幾乎無保留,輔料空白對其測定有干擾。 結(jié)構(gòu)如圖所示: 原條件 色譜柱:Ultimate? AQ-C18(4.6×250mm,5μm)。 流動(dòng)相:磷酸鹽緩沖液:乙腈=95:5; 分析 目標(biāo)峰極性大,在C18柱上無保留,在3分鐘左右出峰,與輔料空白重合,無法分離。 藍(lán)色—輔料峰 黑色—目標(biāo)物 方法開發(fā)思路 要使目標(biāo)物質(zhì)與輔料分離,必須增強(qiáng)目標(biāo)化合物的保留能力。該物質(zhì)結(jié)構(gòu)上有兩個(gè)氨基,可考慮流動(dòng)相中加離子對試劑的模式測定,結(jié)合其檢測波長(205nm),可選擇在流動(dòng)相體系中加入十二烷基硫酸鈉進(jìn)行測定,通過方法調(diào)整優(yōu)化,可排除空白輔料對雜質(zhì)的干擾。 調(diào)整后的色譜條件 色譜柱:Ultimate? XB-C18(4.6×250mm,5μm)。 流動(dòng)相:0.01mol/L磷酸二氫鉀+0.5g/L十二烷基硫酸鈉(pH2.5)/乙腈=70/30。 分析 與預(yù)期一致,目標(biāo)化合物的保留在該體系下增強(qiáng)明顯,不受輔料空白影響,可實(shí)現(xiàn)較好的保留與分離。
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